多肽的二級(jí)結(jié)構(gòu)分析方看完你就知道了

　　多肽合成(化學(xué))方法，包括液相和固相兩種方法。液相多肽合成方法現(xiàn)在主要采用BOC和Z兩種保護(hù)方法，現(xiàn)在主要應(yīng)用在短肽合成，如阿斯巴甜，力肽，催產(chǎn)素等，其相對(duì)與固相多肽合成，具有保護(hù)基選擇多，成本低廉，合成規(guī)模容易放大的許多優(yōu)點(diǎn)。
 

　　下面讓我們?cè)賮?lái)了解一下多肽的二級(jí)結(jié)構(gòu)分析方法吧
 

　　1.圓二色譜(CD)
 

　　圓二色譜是一種特殊的吸收譜，它通過(guò)測(cè)量蛋白質(zhì)等生物大分子的圓二色光譜，從而得到生物大分子的二級(jí)結(jié)構(gòu)，簡(jiǎn)單、快捷，廣泛應(yīng)用在蛋白質(zhì)折疊，蛋白質(zhì)構(gòu)象研究，酶動(dòng)力學(xué)等領(lǐng)域。圓二色譜紫外區(qū)段(190-240nm)，主要生色團(tuán)是肽鏈，這一波長(zhǎng)范圍的CD譜包含了生物大分子主鏈構(gòu)象的信息。α-螺旋構(gòu)象的CD譜在222nm、208nm處呈負(fù)峰，在190nm附近有一正峰。β-折疊構(gòu)象的CD譜，在217-218nm處有一負(fù)峰，在195-198nm處有一強(qiáng)的正峰。無(wú)規(guī)則卷曲構(gòu)象的CD譜在198nm附近有一負(fù)峰，在220nm附近有一小而寬的正峰。
 

　　2.核磁共振(NMR)
 

　　隨著二維、三維以及四維NMR的應(yīng)用，分子生物學(xué)、計(jì)算機(jī)處理技術(shù)的發(fā)展，使NMR逐漸成為大分子結(jié)構(gòu)物質(zhì)分析的主要方法之一。NMR可用于確定氨基酸序列、分布以及構(gòu)象。目前，NMR在分析分子中含少于30個(gè)氨基酸的小肽時(shí)是非常有用的，分析結(jié)果快速準(zhǔn)確。
 

　　3.X-衍射
 

　　X-衍射可獲得有關(guān)化合物晶型的直接信息，而且可以判斷相對(duì)與構(gòu)型。
 

　　多肽標(biāo)記及修飾
 

　　目前多肽標(biāo)記及修飾的內(nèi)容非常多，廣泛應(yīng)用在多肽藥物，多肽生物學(xué)，多肽抗體以及多肽試劑的研究中。目前應(yīng)用廣泛的有：非放射性核素標(biāo)記(C13，H2)，熒光標(biāo)記(FAM，F(xiàn)ITC)，生物素標(biāo)記，磷酸化修飾等。